羅氏電化學發光免疫分析總結

技術是羅氏公司開發的，但全自動機械製造卻由日本的日立公司承擔，所以儀器上還有Hitachi的標誌。這個儀器讓大家吃驚的一大原因就在於一直在實驗室研究的電致化學發光居然已經真正地產業化了，其中我們一直無法解決的諸多問題（尤其是重現性）均已得到解答，看來羅氏的確花了不少心血開發這款儀器。

羅氏電化學發光免疫分析技術的性能特點——創新的技術，與眾不同

一、最先進的檢測原理

電化學發光免疫測定，是目前最先進的標記免疫測定技術，是繼放射免疫、酶免疫、熒光免疫、化學發光免疫測定以後的新一代標記免疫測定技術，具有敏感、快速和穩定的`特點，在固相標記免疫測定中技術上居領先地位。 電化學發光（ECL）是一種在電極表面由電化學引發的特異性化學發光反應，實際上是電化學和化學發光兩個過程的完美結合。電化學發光與普通化學發光的主要差異在於前者是電啟動發光反應，循環及多次發光，後者是通過化合物混合啟動發光反應，是單次瞬間發光。因此ECL反應易精確控制，重複性極好。

電化學發光免疫測定是電化學發光（ECL）和免疫測定相結合的產物，直接以[Ru(bpy)3]2+標記抗體，反應時標記物直接發光。且[Ru(bpy)3]2+在電極表面的反應過程可以周而復始進行，產生許多光子，使光信號得以增強。

二、專利的包被技術

鏈黴親和素（streptoavidin，SA）和生物素（biotin，B）是具有很強的非共價相互作用的一對化合物，特異性強且結合緊密。一分子SA可與四分子B相結合，增大了抗體結合量，達到放大效果。在ECL的試劑中，SA通過特殊的蛋白結合物均勻牢固地包被在磁性微粒上，形成通用的能與B結合的固相載體，另一試劑為活化的B衍生物化合的抗原或抗體。兩種試劑混合時，抗原或抗體即包被在磁性微粒上。

三、獨特的載體

ECL中採用的固相載體是帶有磁性的直徑約2.8?m的聚苯乙烯微粒。其特點是反應面積極大，比板式擴大20－30倍，使反應在近乎液相中進行，反應速度大大加快，利用氧化鐵的磁性，使用電磁場分離結合態和遊離態，方便迅速，實現了精確的全自動化。

四、獨到的磁分離技術

實現了結合相和遊離相的完全自動化分離，且檢測池在無電場時徹底清洗，避免了交叉污染。

五、超高的測定靈敏度和測定線性

發光信號檢測的寬線性加上電化學發光獨特的標記物本身（發光底物）循環發光和專利的鏈黴親和素-生物素包被技術的信號放大作用，使電化學發光測定的檢測下限可達10-12和10-18級，線性範圍最大超越7個數量級，在待測抗原（抗體）極微量或達到病理期極限時，均能準確測定，避免了樣本稀釋重測定，既節約時間，又節省試劑。

六、穩定的試劑

電化學發光標記物三聯吡啶釕在無電場和遞電子體（三丙胺）存在的自然環境下非常穩定，保證了用它標記的抗體（抗原）試劑也非常穩定，2－8℃可穩定一年以上，批內和批間變異係數分別為<4%和<7%，在首日使用之後也可以穩定3個月。

七、簡便創新的定標概念

每個測定項目的基本定標曲線已由羅氏公司完成，並已存入試劑的二維條形碼，自動讀入儀器，用户只需進行二點重定標即可。

八、簡便穩妥的二維條形碼——當代最先進的全自動信息處理技術

二維條形碼是電化學發光分析儀的“信息高速公路”，可以存儲超過一千字節的信息，使同批試劑僅做一次2點定標，亦使儀器自動化程度升高，不必做大量的定標、質控等前期工作，廠家已做12點標準曲線，既節約時間，又保障結果的準確。

九、先進的閃爍存儲技術

斷電時軟件數據永不丟失，避免硬盤損壞，導致系統崩潰，啟動速度比硬盤快10倍。

十、廣泛的應用範圍和廣闊的開發前景

檢測項目廣泛應用於甲狀腺、性激素、骨代謝、心肌梗塞、腫瘤標誌物、傳染病抗原抗體等的定量測定。

ECL分析原理中採用三聯吡啶釕作為標記物，其活化衍生物是三聯吡啶釕＋N羥基琥珀酸胺酯（NHS）。該衍生物性能穩定，且分子量很小，產生的空間位阻小，與免疫球蛋白的分子比超過20仍不會影響抗體的可溶性和免疫活性，因此它可與抗體、半抗原、激素、核酸等各種生物分子結合形成穩定的標記物，使檢測的菜單大大豐富，為其檢測菜單的開發前景提供了廣闊空間。 羅氏收購寶靈曼後，設有專職的研發部門為電化學發光分析儀開發配套試劑，所以每年都會有5－10個新項目問世，為用户的項目拓展奠定了基礎。