2016年大學聯考生物基礎知識點鞏固試題
下面小編整理了歷年來大學聯考生物常考的知識點，並如何把這些知識點運用到考試中來。
考點《血紅蛋白的提取與分離》
思維激活
判斷正誤
(1)利用凝膠色譜法分離蛋白質時，相對分子質量小的先洗脱出來( )。
(2)在電泳過程中，蛋白質分子的移動速度，與分子本身的大小和形狀無關，而與所帶電荷的差異有關( )。
(3)在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中，電泳遷移率完全取決於分子的大小( )。
答案 (1)× (2)× (3)×
血紅蛋白提取和分離過程的考查
(·廣東理綜，5)以下關於豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是( )。
A.洗滌紅細胞時，使用生理鹽水可防止紅細胞破裂
B.豬成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核，提純時雜蛋白較少
C.血紅蛋白的顏色可用於凝膠色譜法分離過程的監測
D.在凝膠色譜法分離過程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動慢
解析 豬成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核，提純時雜蛋白較少，是提純血紅蛋白的理想材料。提純血紅蛋白分四步：紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析，其中洗滌紅細胞時，要用生理鹽水反覆洗滌，既要將紅細胞洗滌乾淨，又要不破壞紅細胞，然後再用蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂，釋放出血紅蛋白。分離提純的血紅蛋白時用凝膠色譜法，是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質，相對分子質量大的蛋白質移動速度較快;血紅蛋白的顏色可用於觀察紅色區帶的移動情況，並據此判斷分離效果。
答案 D
[對點強化]
紅細胞中含有大量的血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗來提取和分離血紅蛋白。下列關於血紅蛋白提取和分離的敍述，錯誤的是( )。
A.血紅蛋白提取和分離一般按照樣品處理―→粗分離―→純化―→純度鑑定的順序進行
B.純化過程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來配製凝膠懸浮液
C.粗分離中透析的目的是去除相對分子質量較小的雜質
D.可經SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑑定
解析 蛋白質的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑑定。提取和分離血紅蛋白時，首先通過洗滌紅細胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液，即樣品處理;再通過透析法除去相對分子質量較小的雜質，即樣品的粗分離;然後通過凝膠色譜法將相對分子質量較大的雜蛋白除去，即樣品純化，純化過程中凝膠應用蒸餾水充分溶脹後，配製成凝膠懸浮液，而不是用生理鹽水;最後經SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑑定。
答案 B
歸納比較
1.分離DNA、PCR技術、分離蛋白質的比較
分離DNA PCR技術 分離蛋白質 實驗原理 DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶於冷酒精 利用DNA熱變性原理體外擴增DNA 依據相對分子質量的.大小不同來分離蛋白質 實驗過程 選取材料―→破碎細胞釋放DNA―→除雜―→DNA析出與鑑定 變性―→復性―→延伸 樣品處理―→凝膠色譜操作 實驗結果 獲得較純淨的DNA 獲得大量DNA 相對分子質量不同的蛋白質得以分離 實驗意義 為DNA研究打下基礎 解決了DNA研究中材料不足的問題 為蛋白質的研究和利用提供了原材料 2.比較瓊脂糖凝膠電泳和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳
(1)從載體上看，利用瓊脂糖凝膠作為載體的是瓊脂糖凝膠電泳，利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠作為載體的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。
(2)從依據上看，利用了分子帶電性質差異和分子大小的是瓊脂糖凝膠電泳，僅利用了分子大小的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。
(3)從優點上看，瓊脂糖凝膠電泳操作簡單，電泳速度快，樣品不需處理，電泳圖譜清晰，分辨率高，重複性好;SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳消除了淨電荷對遷移率的影響，使電泳遷移率完全取決於分子的大小。
