微生物實習報告

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微生物實習報告

微生物實習報告1

一、實習目的意義

1、通過實習過程掌握酸奶中乳酸細菌的分離純化;

2、土壤中自生固N菌分離、純化、生長曲線測定 :通過實習過程,掌握土壤中微生物的分離、純化和生長曲線測定的技術;

3、參觀臨安青山污水處理廠:參觀污水處理廠,瞭解其運行模式,以及在污水處理過程中微生物發揮的作用和技術;

4、參觀富陽海正藥業有限公司:瞭解一個大公司大企業的運行情況,以及專業方面的一些技術和應用。

二、實習地概況

1、第一個和第二個實驗是在學校學六實驗室完成的;

2、第三個實驗:臨安市青山污水處理有限公司成立於20xx年3月21日,於20xx年5月1日投入試運行,是一個集污水收集、處理於一體的公益事業企業。公司坐落於浙江省臨安市青山湖街道研口村發達畈,佔地66畝,近期投資8082萬元,建成處理能力2萬噸/日,收集管網42公里,工藝採用MSBR法,具有脱氨除磷功能的污水處理設施。公司堅持內抓管理強素質,外創先進塑形象,通過規範化、制度化、精細化、科學化的管理來不斷提高污水處理水平,努力提升科學管理層次,切實增強企業核心競爭力。公司設備、工藝先進,技術力量雄厚,現有職工21人,其中技術人員15人。公司先後通過了ISO9000和ISO14000質量環境管理體系認證及清潔生產認證。同時被評為浙江省公眾滿意單位杭州市環境保護模範企業、臨安市花園式工廠、臨安市安全聲場先進單位、臨安市衞生先進單位、臨安市綠色企業等榮譽稱號。

3、第四個實驗:佔地16000平方米,累計投資超過2.6億元,設有60多個單元實驗室,集小試、中試與研發支持為一體 。始創於1956年的浙江海正藥業股份有限公司秉承“執著藥物創新,成就健康夢想”的使命和“成為廣受尊重的全球化製藥企業”的願景,致力於整合藥物研發與生產資源,為全球客户提供更好的產品和服務,通過美國FDA、歐盟EDQM、澳大利亞TGA、韓國KFDA等官方認證的品種達到40多個,銷往全球30多個國家和地區。

20xx年,公司榮獲“全國五一勞動獎狀”,海正、HISUN及圖形被認定為“中國馳名商標”,入選“中國萬種微生物基因組計劃”和“國家重大(磅)級藥物品種產業化技術創新聯盟”。因圓滿完成“抗甲流藥物中間體生產”的國家任務,受到省政府的通令嘉獎。

20xx年,公司入選浙江省醫藥工業“十強企業”,並榮獲“國內最佳產品線十佳工業企業” 稱號,同時被譽為“金蜜蜂獎成長型企業”。我們主要參觀了海正藥業在富陽的分公司。

三、材料方法

1、材料:乳酸細菌培養基、酸奶

原理:當乳酸菌生長代謝出乳酸後,會是PH下降而使顏色由綠變為黃綠,也由於PH值降低,再加上抗生素及厭氧培養的作用,所以一般的微生物不容易在此培養基上生長。因此十分容易鑑別乳酸菌。

方法 :1.1 (6月7日)配備乳酸細菌培養基(蛋白腖10.0G,牛肉膏10.0G,酵母膏5.0G,檸檬酸氫二銨2.0G,葡萄糖20.0G,吐温80 1.0ML,乙酸鈉5.0G,磷酸氫二鉀2.0G,硫酸鎂0.58G,硫酸錳0.25G,瓊脂18.0G,蒸餾水1000ML,PH 6.2—6.6)

1.2 (6月7日)培養基滅菌

1.3 (6月8日)用滅菌後冷卻至50攝示度左右的培養基到成平板

1.4 (6月8日)用滅菌過的接種環挑取酸奶在平板上劃線純化培養4天左右

1.5 (6月12日)挑取平板上菌落製成臨時裝片觀察

2、材料:阿須貝無氮培養基、土壤

方法:2.1 (6月12日)配備阿須貝無氮培養基(葡萄糖10.0G, 磷酸氫二鉀0.2G, 硫酸鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,瓊脂18G,蒸餾1000ML,PH7.2) 阿須貝無氮培養液(葡萄糖10.0G, 磷酸氫二鉀0.2G, 硫酸鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,蒸餾水1000ML,PH7.2)

2.2 (6月12日)培養基,培養液滅菌

2.3 (6月12日)用滅菌後冷卻至50攝示度左右的阿須貝無氮培養基到成平板

2.4 (6月12日)用滅菌過的鑷子將黃豆大小的菜園土埋入已冷凝的平板培養基上

2.5 (6月12日)正面放置28度培養4天

2.6 (6月18日)用滅菌過的接種環挑取菌苔在新的阿須貝平板上劃線純化32度 培養

2.7 (6月20日)單菌落接入液體培養基中於H後測吸光值.製備生長曲線

四、結果分析

平板上有一個個單菌落.在顯微鏡下觀察單菌落就只有一種乳酸菌。酸奶中有保加利亞乳菌與嗜熱鏈球菌二種。

五、實習感受

通過此次實習,我學到了很多課堂上學不到的東西:親自動手配培養基,分離、純化菌類,學會使用分光光度計製作生長曲線,同時參觀了一些與微生物緊密相連的公司,瞭解其運行模式、實踐技術和應用。這讓我清楚地感到了自己肩上的重任,看清了自己的人生方向,也讓我認識到了科研工作應支持仔細認真的工作態度,要有一種平和的心態和不恥下問的`精神,不管遇到什麼事都要去思考,多聽別人的建議,不要太過急燥,要對自己所做的事去負責,不要輕易地去承諾,承諾了就要努力去兑現。實習也培養了我的實際動手能力,增加了實際的操作經驗,對實際的科研工作的有了一個新的開始,更好地為我們今後的工作積累經驗。

我知道科研工作是一項需要熱情的事業,並且要持之以恆的精神和吃苦耐勞的品質。我覺得重要的是在這段實習期間裏,我第一次真正地接觸了實驗,在實踐中瞭解了一些科研技術,並且在此期間,我參觀了一些公司,也與社會有所接觸。利用這次難得的機會,也打開了視野,增長了見識,為我們以後進一步走向社會打下堅實的基礎。

實習期間,我從末出現無故缺勤。我認真聽取老師的指導,對於別人提出的實驗建議虛心聽取,並能夠仔細觀察、切身體驗、獨立思考、綜合分析,並努力把學到的知道應用到實際實驗操作中去,盡力做到理論和實際相結合的最佳狀態,培養了我的耐心和素質。

為期兩個多星期的實習結束了,我在兩個多星期的實習中學到了很多在課堂上根本就學不到的知識,受益匪淺。回想自己在這期間的實習情況,也有不足之處。對此我思考過,學習經驗自然是一個因素,然而更重要的是心態的轉變沒有做到位,有些實驗步驟還是停留在應付的層面上。現在發現了這個不足之處,應該還算是及時吧,因為我明白了何謂工作何謂實際。在接下來的日子裏,我會朝這個方向努力,在實驗操作方面我會更加謹慎。

本次實習是我第一次親身感受了所學知識與實際的應用,理論與實際的相結合,讓我們大開 眼界,也算是對以前所學知識的一個初審吧!這次實習對於我們以後學習、找工作也真是受益匪淺。 我會把這此實習作為我人生的起點,在以後的工作學習中不斷要求自己,完善自己,讓自己做的更好。

微生物實習報告2

1、目的

通過實習使學生將理性知識與感性認識有機地結合,將書本知識用於實驗,在實驗中更深地理解基礎理論,提高學生的綜合能力與創新意識。通過實習,掌握培養基的配製、分裝及滅菌方法;掌握微生物的接種技術;掌握微生物的冷凍乾燥保藏方法。

2、要求

(1)注重微生物學基礎實驗技能的掌握與提高,克服盲目追求新穎而忽視基礎的傾向;

(2)課程實習前要預習,明確每次實驗的目的與基本步驟;

(3)在實驗中要有嚴緊的科學態度,尊重事實與實驗結果,要善於發現新現象;

(4)樹立密切合作的風氣,包括學生與老師、班與班、組與組、組長與組員之間的密切配合。

二、實習內容

1、培養基的配製和滅菌。

2、微生物(金葡菌)的接種。

3、菌種的(金葡菌)的冷凍乾燥保藏方法。

4、日程安排:

第一天實習課程的講授;實習工具、儀器和設備的準備(包括培養基的配製、倒平板、金葡菌的活化、保護劑的配製)。

第二天金葡菌由固體培養基轉接至液體培養基;準備第三天的'實驗器具。第三天菌種凍幹前的預處理。第四天菌種的凍幹操作。第五天凍幹機關機,菌種保藏。

三、主要材料和儀器設備

天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、分裝架、移液槍、培養皿、玻璃棒、燒杯、試管架、剪刀、酒精燈、硅膠塞、線繩、報

紙、乳膠管、電爐、高壓滅菌鍋、乾燥箱、牛肉膏、蛋白腖、NaCl、瓊脂、金葡菌斜面培養物、接種環、凍幹機、西林瓶、離心機、生化培養箱等。

四、操作方法

1.製備培養基

2.配製保護劑:鮮牛奶3000r/min離心30min,棄去上層脂肪,加9倍體積生理鹽水,分裝,121℃(或116℃)高壓滅菌20min後備用。保護劑的作用可能是在冷凍乾燥的脱水過程中代替結合水而穩定細胞成分(細胞膜)的構型,防止細胞膜因為凍結而破壞。保護劑還可以起支持作用,使微生物疏鬆地固定在上面。

3.包2根離心管、4根大槍頭、2個西林瓶、1根8ml生理鹽水、1根保護劑,121℃滅菌20min。

4.把菌種從平板培養物接種至平板培養基(菌種的活化):

(1)把接種環放在酒精燈上消毒,消毒時應使接種環完全燒紅;

(2)待接種環冷卻後,用接種環從平板上沾取少許菌苔;

(3)然後用接種環在平板培養基上畫線;

(4)把平板培養基拿去37℃培養24h

5.把菌種從平板培養物接種至液體培養基(液體接種法):

(1)用接種環從平板上沾取少許菌苔;

(2)在管內靠近液麪試管壁上將菌苔輕輕研磨並輕輕振盪,或將接種環在液體內振搖幾次;

(3)將液體肉湯培養基150r/min搖牀37℃培養24h。

接種液體培養物時應特別注意勿使菌液濺在工作台上或其他器皿上,以免造成污染。如有濺污,可用酒精棉球灼燒滅菌後,再用消毒液擦淨。凡吸過菌液的吸管或滴管,應立即放入盛有消毒液的容器內。

6.把滅菌物品烘乾備用

7.拿出液體培養基:取出5ml菌液放入無菌離心管4000r/min離心20min,傾去上清液,再用5ml無菌生理鹽水將菌泥重新懸浮,再次4000r/min離心20min,傾去上清液,用5ml滅菌保護劑將菌泥重新懸浮,之後就可以分裝入西林瓶,每瓶1ml(液麪高度3~5mm)。

8.預凍:分裝好的菌種管放-80℃預凍2h,同時開啟凍幹機的製冷機,也可在凍幹機的冷阱中預凍菌種。

9.凍幹:當凍幹機冷阱温度達到-40℃時,將預凍好的西林瓶放進壓蓋乾燥架中,

把假蓋板放在冷阱上,再將乾燥架放在冷阱上方,罩上壓蓋有機玻璃罩,罩下端要與“O”型密封圈完全接觸。順時針擰緊真空閥,按“真空計”鍵,顯示真空度為100~110×103,再按“真空泵”鍵,真空泵工作(真空泵的蓋子要打開),15Pa以下為正常,凍幹開始。10.壓蓋:24h後,視感物料已完全乾燥,按順時針方向轉動有機玻璃罩上方手柄,使罩中壓蓋架絲槓轉動下移,將瓶蓋壓入瓶中,實現在真空中壓蓋。

11.關機:按逆時針方向打開真空閥充氣,按“真空泵”鍵,真空泵停止運轉。取下有機玻璃罩,拿出西林瓶保存。

五、注意事項

需滅菌的物品應嚴格滅菌,避免污染雜菌;2.接種時應該要等接種環完全冷卻後再接種;

3.凍干時,西林瓶的蓋子一定要放好,即使西林瓶中的空氣可以出來形成真空,又能在壓蓋的時候可以把蓋子蓋好。

六、實習結果

上圖中蓋子已經掉了的和西林瓶中還是液體的都是實驗失敗的,蓋子即沒掉瓶子中的菌種又是粉末狀的為實驗成功的。

蓋子掉了的:是因為抽氣時,氣流流動使瓶子掉下來。

瓶子中還是液體的:是因為蓋子蓋的太緊,瓶中的空氣抽不出來,水分也沒抽出,導致瓶子中的菌種未變成粉末狀。

七、實習總結或體會

通過這個實習,掌握了培養基的配製、分裝及滅菌方法;掌握了微生物的接種技術;掌握了微生物的冷凍乾燥保藏方法。通過實習將理性知識與感性認識有機地結合,將書本知識用於實驗,在實驗中更深地理解基礎理論,明白了需滅菌的物品應嚴格滅菌,避免污染雜。也讓我的綜合能力與創新意識得到了提高。

微生物實習報告3

一、實習時間:

20xx.6.7-6.12

二、實習地點:

食品發酵實驗室(化學樓119、123)、食品學院實習基地

三、實習目的:

1、學習自制酸奶的方法,熟悉從酸奶中分離和純化乳酸菌的一般方法。

2、掌握各類酸奶生產的基本工藝和要求。

3、學習奶酒的發酵過程、工藝流程,及其注意事項。

4、對自己所學的科學知識進一步深化,提高實踐能力,整體策劃部署能力,動手能力,組織能力,團體協作能力,創新能力等方面也有一些提高。

四、實習內容:

1.酵母菌篩選方案的確定

為了獲得最佳酵母菌發酵結果,我們通過對Internet資源以及圖書資料的搜索和查尋,查的產酯酵母廣泛應用於白酒、黃酒、普通酒、醋、醬油中,另外,還應用於果汁中。

所以我們準備了三種菌種來源材料:果皮、酒麴、保藏的酵母斜面。第一種方法是利用果皮做來源,將削下的果皮放入帶玻璃珠的三角瓶充分振搖,梯度稀釋,塗布於YPD瓊脂培養基上。第二種方法是用各種酒麴做為菌種來源,將酒麴粉碎,稱量,梯度稀釋,而後塗布於YPD瓊脂培養基上。第三種方法是利用保藏的酵母斜面作為菌種來源,用接種環在酵母斜面上取一環菌,而後用劃線法接種於YPD瓊脂平板上,帶用於實驗。

經過大家的討論後,一致決定利用酵母斜面上的菌種,對其進行培養。因為利用酵母斜面上的菌種在此次實習中可以用到我們實驗上所學習的知識,真正將知識用於實踐,並在實踐中得到鞏固。但是,酵母斜面上的酵母菌製得的菌懸液濃度很大,所以在菌種篩選方面,我們將菌懸液10進制稀釋到10-5,10-6,10-7的數量級,各濃度塗布兩個平板,另六個平板用於劃線分離法進行菌種分離,30度培養24到48h,觀察平板上的菌落生長情況。初選出酵母菌,將菌落照片後就進行顯微鏡觀察,篩選到典型的酵母菌株,進行生化實驗。將平板上的酵母單菌落接種保藏於斜面培養基(PDA),30度培養48h後,4度冷藏。將PDA斜面培養基上保存的酵母菌接種於培養液中培養,而後接種於豆芽汁發酵液中,進行發酵測產脂能力。

2.酵母菌的篩選及鑑定

11月25日我們按照討論決定的方案進行了酵母菌的篩選實驗,實驗內容如下:

2.1培養基的製備、分裝、滅菌(分述在下文中)

在實習中共需要準備六種培養基:YPD培養基、PDA培養基、豆芽汁培養基、葡萄糖產酸產氣培養基、硝酸鹽生化實驗培養基、糖發酵實驗培養基。各培養基配方如下:

1、YPD培養基:1%酵母膏,2%蛋白腖,2%葡萄糖,2%瓊脂。

2、PDA培養基:2%馬鈴薯,2%葡萄糖,22%瓊脂。

秤取切成小塊的馬鈴薯,加水煮爛(20-30min),八層紗布過濾,濾液中加入葡萄糖,最後加入瓊脂。

3、豆芽汁培養基:10%黃豆芽,2%葡萄糖,2%瓊脂

洗淨豆芽,加水煮沸30min.用紗布過濾。濾液加入瓊脂,加熱溶解後放入糖,攪拌使它溶解,補水至設定值。

4、糖產酸產氣培養基:營養物(0.5%牛肉膏,1%蛋白腖,0.3%氯化

鈉,0.2%磷酸氫鈉,0.2%溴麝香草酚藍)配方為20g/1000ml,蒸餾水配製,pH7.4。分裝後加葡萄糖0.5%。

5、硝酸鹽生化實驗培養基:0.3%牛肉浸膏,0.5%-1%蛋白腖,pH7.0(100ml培養基加入1g硝酸鉀)

6、糖發酵實驗培養基:營養物(0.5%牛肉膏,1%蛋白腖,0.3%氯化鈉,0.2%磷酸氫鈉,0.2%溴麝香草酚藍)配方為20g/1000ml,蒸餾水配製,pH7.4。分裝後加乳糖0.5%。

製備:由於第6種培養基同第4種培養基,則一組配製即可,再加上無菌水,共需製備六種,則將全班分成六個組,我們為第4組,故配製過程如下:

(1)天平調平。

(2)準確秤取7.8g營養物(配390ml),葡萄糖、蔗糖、乳糖各0.65g。

(3)將營養物放入搪瓷缸中,加入390ml蒸餾水,玻璃棒攪拌將其溶解。

(4)pH試紙測其pH是否為7.4,若不是,用氫氧化鈉溶液調到7.4。分裝:

(1)取三個250ml錐形瓶,每個錐形瓶中倒入130ml的上述溶液。

(2)將上述稱好的葡萄糖、蔗糖、乳糖分別倒入三個錐形瓶中,搖晃錐形瓶使其溶解。

(3)將加入糖的營養液分別裝入12個試管中,每個試管用移液管放入10ml。

(4)將每兩個葡萄糖、蔗糖、乳糖用牛皮紙紮成一捆,即每6個試管紮成一捆,寫上班級、組別後待滅菌。

滅菌:將已經包紮好的試管放入滅菌箱中,進行滅菌待用。

以上就是我們組的製備過程,在這個過程中應該注意以下幾點:

1、稱量前天平要調平。

2、秤取營養物時應準確秤取。

3、溶解後注意調pH值到7.4

4、量取培養液時要準確,特別是向試管中分裝時要用移液管。

2.2酵母菌的分離(詳述分離方法,培養條件及觀察到的菌落結果)

步驟過程:

1、倒平板:待YPD培養基冷卻至50度左右後,按無菌操作法倒12只平板(每皿約倒15ml),平置,待凝。

2、酵母菌稀釋:取1mL菌懸液放入裝有99ml的無菌水錐形瓶中,搖勻後再從錐形瓶中取1mL放入1號管,依次進行,則管裏酵母的濃度依次是10-2~10-7。

3、平板分離:依次從10-7,10-6,10-5的管裏取稀釋液進行塗布平板,YPD平板每個濃度塗兩個。

4、劃線法分離:用接種環從酵母斜面上取一環酵母,在酒精燈前按無菌操作法進行劃線,將酵母接種於6個平板中。

5、恆温培養:將12個培養皿平板置於30℃恆温箱中培養24~48小時。結果:

觀察菌落:出現了4種不同形態的菌落。

①圓形,菌落大,表面光滑,濕潤,突起,乳白色。

②圓形,菌落略小,濕潤,突起,質地均勻,呈乳白色。

③橢圓形,菌落略小,濕潤,突起,顏色均一,呈乳白色。

④橢圓形,菌落大,濕潤,突起,顏色均一,呈乳白色。

結果分析:

通過網上查閲資料顯示,正常條件下大多數酵母菌的菌落特徵與細菌相似,但比細菌菌落大而厚,菌落表面光滑、濕潤、粘稠,容易挑起,菌落質地均勻,正反面和邊緣、中央部位的顏色都很均一,菌落多為乳白色,少數為紅色,個別為黑色。啤酒酵母的菌落紅酵母的菌落各種酵母菌的菌落。

將我們觀察的結果與資料相比,確實符合大多數酵母菌的菌落形態。結論:觀察到的是酵母菌落。

2.3酵母菌的初步鑑定(包括革蘭氏染色和糖代謝實驗)

2.3.1將平板上分離到的各菌株進行簡單染色後進行鏡檢

觀察結果為:

球菌,各個細胞的形狀比較規整。

結論:

通過菌體個體形態和菌落形態,初步確定出了一株酵母菌。

注意事項:

1、搬動顯微鏡時應一手握住鏡臂,另一手托住底座,鏡身保持直立,並緊靠身體,步態穩健。切記單手拎提,以免目鏡頭從鏡筒上掉出而砸壞。

2、各個鏡面切忌用手塗抹,以免手上的油、汗污染鏡面,造成發黴、腐蝕。

2.3.2將初步確定的菌株進行生化實驗

步驟過程:

用接種環從平板上挑取已分離的`同一菌落接種於糖發酵管和硝酸鹽生化管中,接種完後30℃培養。24小時後觀察結果。

與此同時,將平板上的酵母單菌落接種保藏於斜面培養基(PDA),30度培養48小時後,4度冷藏,待檢其他特性。

結果:

驗中並沒有觀察到,但硝酸鹽管中變黃,則分析結果,可能是酵母菌生長不旺盛,導致即使產氣也看不出來。

根據這一現象,能夠説明該菌株具有產酸產氣性能,確定此菌株確實是酵母菌。

3、發酵產酯實驗(11.23-11.24)

步驟過程:

(1)準確吸取25ml發酵液於250ml錐形瓶中,加入25ml蒸餾水,滴2滴酚酞指示劑,用0.1mol/L的氫氧化鈉滴至微紅色,記下消耗氫氧化鈉溶液的體積。

(2)將滴定後的發酵液轉移至250ml錐形瓶中,準確加入15ml上述氫氧化鈉標液,接上冷凝管,加熱至沸迴流30min。

(3)取下冷卻至室温,完全轉移至250ml碘量瓶中立即用0.1mol/L的鹽酸溶液滴定至微紅色剛好消失,紀錄鹽酸溶液的用量,記錄總酯的含量。結果:

氫氧化鈉消耗體積:V1=1.9ml

鹽酸消耗體積:V2>15ml

分析與結論:氫氧化鈉消耗體積1.9ml用來預估總酯含量,且其越大則總酯越少。由此可見,產酯量應該不少。

按公式:總酯=(15-V2)X0.1X10-3mol但是我們滴到18ml仍不見結果,並且沒有要到微紅的跡象。可能是由於配製實驗試劑時出現問題,導致沒有測出總酯量。

五、總結

短短一週的微生物實習在緊張又有效率的節奏下順利的結束了。這是我們自己在老師協助下並親自動手連續完成的一些列實驗,在其中感受到了很多平時和課上很少遇到的東西,有自主,有探索,有反思,有合作

短暫的實習轉眼而過,回顧實習生活,我在實習的過程中,既有收穫的喜悦,也有一些遺憾。喜悦是我們都在老師的指導下自主設計了方案並分工鮮明,合理掌握每一步實驗用時及時、準確測量數據,最終都得到了相應的結果。而遺憾那就是對實驗有些方面的認識僅僅停留在表面,只是在看人做,聽人講如何做,未能夠親身感受、具體處理一些工作,所以未能領會其精髓。但時通過實習,加深了我對實驗和微生物基本知識的理解,豐富了我的微生物實驗的知識,使我對實驗有了深層次的感性和理性認識。認識到要做好實驗,既要注重理論知識的學習,更重要的是要把實踐與理論兩者緊密相結合。更進一步體會到了“實踐是最好的老師”的深刻意義。

微生物實習報告4

姓名:初旭

班級:食品12-3班

學號:120424301

指導教師:歐陽傑

實習一 牛欄山酒廠

一. 實習目的

1. 瞭解牛欄山酒廠的歷史和酒文化

2. 通過參觀瞭解白酒的製作工藝流程

二.實習地點

北京市順義區牛欄山酒廠

三.相關企業介紹

牛欄山酒廠,中國歷史悠久的釀酒廠之一。依據現保存在順義檔案館的《順義縣誌》記載,從有詳細釀酒歷史記載的康熙五十八年(1719)年算起,釀酒古鎮牛欄山的“酒齡”已近300年。據民國20年《順義縣誌·實業志》載:“牛欄山鎮造酒工作是工者約百餘人(受僱於治內十一家燒鍋),所釀之酒甘冽異常為北平特產,銷售鄰縣或平市,頗膾炙人口,而尤以牛欄山之酒為最著”。

牛欄山酒廠自1952年在“公利號”、“富順成”、“魁勝號”、“義信號”四家老燒鍋的基礎上成立建廠,現已發展成為國有大型企業,總資產達5.1億元,是北京市年產白酒5萬噸以上的生產廠家之一。企業現有幹部職工1500餘人,主要生產以“牛欄山”牌二鍋頭等共計170餘種酒類產品,產品深受消費者青眯。

四.牛欄山二鍋頭基本概述

牛欄山二鍋頭,二鍋頭之宗。二鍋頭作為京酒的代表,已有八百多年的歷史。京師釀酒師蒸酒時,去第一鍋“酒頭”,棄第三鍋“酒尾”,“掐頭去尾取中段”,唯取第二鍋之貴釀。牛欄山二鍋頭,宗氣一脈相傳,於20xx年9月4日榮獲“國家二鍋頭原產地認證”。

二鍋頭酒選用高粱為主要原料,還是以麩曲和酵母為糖化發酵劑,採用傳統的“老五甑”工藝,經原料清蒸、輔料清蒸,低温入池,適當發醇,火蒸餾,掐頭去尾,貯陳精釀而成。

由於二鍋頭酒的酒液清亮透明,香氣芬芳,酒質醇厚,入口甘潤、爽洌,酒力強勁,後勁綿長,回味悠長,因此備受廣大消費者的認可,二鍋頭品牌家族也日漸豐富。

牛欄山二鍋頭的發酵,仍沿用古老的“地缸”發酵法,恪守傳統的“清蒸清燒”釀造工藝。從潤料、糊化到入池發酵,十多道傳統工藝,下足精緻工夫。充分保證,地道二鍋頭之清、香、爽、淨。

五.生產原料和設備

主料:高粱(東北高粱)、玉米、大麥、水(深層地下水)

輔料:豌豆、酒麴

設備:主要有發酵設備、釀造設備、蒸餾設備、灌裝設備等。

六.生產工藝和流程

1.生產工藝

採用續碴清香型麴酒生產工藝。

所謂續碴法是將米碴子(指粉碎後的生原科)蒸料後, 取出酒醅(又稱母糟, 指已發酵的固態醅, 將米碴子和酒醅混合後, 在甑桶內同時進行蒸酒和蒸料(這種操作稱混燒), 然後加曲繼續發酵, 如此反覆進行。由於生產過程一直在加入新料及曲, 故稱續碴發酵法。

其具體工藝流程如下:

工藝流程圖

2.發酵類型

採用的是固態發酵法:其工藝特點是全部釀酒過程的物料流轉都在固體狀態下進行,發酵容器主要採用地缸、窖池、大木桶等發酵設備,多采用甑桶蒸餾。固態發酵的酒質較好。

3. 過程控制

①對原料的控制:高粱是二鍋頭的主要生產原料,酒廠擇優於我國高粱主產區的.東北地區,專門建立了優質原料供應基地,並對原料採取嚴格收購、多次檢測、達標入庫、出庫在檢測等控制方法,保證所有原料均達工藝要求標準。

②對水源控制:釀造二鍋頭使用的是地下三百米處的優質地下水。按工藝要求。酒廠定期對水質進行化驗和檢測,進行反滲透處理。使水質達到國家生活飲用水標準,在此基礎上,水中的一些無機鹽以及電導率等指標也要達到釀酒的要求,才能成為合格的釀酒

用水。

③對勾調工藝的質量控制:目前酒廠盛原酒的容器是陶壇和不鏽鋼桶,有效地保證了原酒的長期存放;其勾調用水需經反滲透處理,以保證牛欄山二鍋頭酒的封為特點和優良品質。

七.實地參觀照片

包裝生產線 陳年窖藏

發酵車間傳統蒸餾工具——“天鍋”

八.實習思考題

1.二鍋頭主要是什麼香型?

答:清香型

2.酒的起源有哪幾種有意思的傳説?

儀狄造酒説

○相傳夏禹時期的儀狄發明了釀酒。

史籍中有多處提到儀狄“作酒而美”、“始作酒醪”的記載,似乎儀狄乃制酒之始祖。公元前二世紀史書《《呂氏春秋》》雲:儀狄作酒。漢代《戰國策》則進一步説明:昔者,帝女令儀狄作酒而美,進之禹,禹飲而甘之,日:‘後世必有飲酒而之國者。'遂疏儀狄而絕旨酒(禹乃夏朝帝王)。

[4]2杜康造酒:關於杜康造酒 ,歷史文獻多有記載,如《世本》雲:“杜康作酒。少康作○

秫酒。”張華《博物志》雲:“杜康作酒。”顧野王《玉篇》雲:“酒,杜康所作。”李瀚《蒙求》雲:“杜康造酒,倉頡制字。”朱肱《酒經》雲:“酒之作尚矣。儀狄作酒醪,杜

康作秫酒。豈以善釀得名,蓋抑始於此耶?”《類書纂要》雲:“儀狄作。杜康造。” 3猿猴造酒:○當猿猴採集的花果及穀物,食後剩餘而殘留或者散落在石巖中,日久由於微生物侵入,遂自然發酵成酒。

3. 牛欄山二鍋頭酒蒸餾時“掐頭去尾”的道理?

蒸酒時,需將蒸餾而得的酒汽,經第一次放入錫鍋內的涼水冷卻而流出的“酒頭”和經第三次換入錫鍋裏的涼水冷卻而流出的“酒尾”提出做其它處理,因為第一鍋和第三鍋冷卻的酒含有多種低沸點的物質成分,味道較雜,所以酒廠只摘取味道醇厚的經第二次換入錫鍋裏的涼水冷卻而流出的酒,故起名為“二鍋頭”。

微生物實習報告5

一、實習目的意義

1、通過實習過程掌握酸奶中乳酸細菌的分離純化

2、土壤中自生固N菌分離、純化、生長曲線測定:通過實習過程,掌握土壤中微生物的分離、純化和生長曲線測定的技術;

3、參觀臨安青山污水處理廠:參觀污水處理廠,瞭解其運行模式,以及在污水處理過程中微生物發揮的作用和技術;

4、參觀富陽海正藥業有限公司:瞭解一個大公司大企業的運行情況,以及專業方面的一些技術和應用。

二、實習地概況

1、第一個和第二個實驗是在學校學六實驗室完成的;

2、第三個實驗:臨安市青山污水處理有限公司成立於20xx年3月21日,於20xx年5月1日投入試運行,是一個集污水收集、處理於一體的公益事業企業。公司坐落於浙江省臨安市青山湖街道研口村發達畈,佔地66畝,近期投資8082萬元,建成處理能力2萬噸/日,收集管網42公里,工藝採用MSBR法,具有脱氨除磷功能的污水處理設施。公司堅持內抓管理強素質,外創先進塑形象,通過規範化、制度化、精細化、科學化的管理來不斷提高污水處理水平,努力提升科學管理層次,切實增強企業核心競爭力。公司設備、工藝先進,技術力量雄厚,現有職工21人,其中技術人員15人。公司先後通過了ISO9000和ISO14000質量環境管理體系認證及清潔生產認證。同時被評為浙江省公眾滿意單位杭州市環境保護模範企業、臨安市花園式工廠、臨安市安全聲場先進單位、臨安市衞生先進單位、臨安市綠色企業等榮譽稱號。

3、第四個實驗:佔地16000平方米,累計投資超過2.6億元,設有60多個單元實驗室,集小試、中試與研發支持為一體。始創於1956年的浙江海正藥業股份有限公司秉承“執著藥物創新,成就健康夢想”的使命和“成為廣受尊重的全球化製藥企業”的願景,致力於整合藥物研發與生產資源,為全球客户提供更好的產品和服務,通過美國FDA、歐盟EDQM、澳大利亞TGA、韓國KFDA等官方認證的品種達到40多個,銷往全球30多個國家和地區。

20xx年,公司榮獲“全國五一勞動獎狀”,海正、HISUN及圖形被認定為“中國馳名商標”,入選“中國萬種微生物基因組計劃”和“國家重大(磅)級藥物品種產業化技術創新聯盟”。因圓滿完成“抗甲流藥物中間體生產”的國家任務,受到省政府的通令嘉獎。

20xx年,公司入選浙江省醫藥工業“十強企業”,並榮獲“國內最佳產品線十佳工業企業”稱號,同時被譽為“金蜜蜂獎成長型企業”。

我們主要參觀了海正藥業在富陽的分公司。

三、材料方法

1、材料:乳酸細菌培養基、酸奶

原理:當乳酸菌生長代謝出乳酸後,會是PH下降而使顏色由綠變為黃綠,也由於PH

值降低,再加上抗生素及厭氧培養的作用,所以一般的微生物不容易在此培養基上生長。因此十分容易鑑別乳酸菌。

方法:1.1(6月7日)配備乳酸細菌培養基(蛋白腖10.0G,牛肉膏10.0G,酵母膏5.0G,

檸檬酸氫二銨2.0G,葡萄糖20.0G,吐温801.0ML,乙酸鈉5.0G,磷酸氫二鉀2.0G,硫酸鎂0.58G,硫酸錳0.25G,瓊脂18.0G,蒸餾水1000ML,PH6.26.6)

1.2(6月7日)培養基滅菌

1.3(6月8日)用滅菌後冷卻至50攝示度左右的培養基到成平板

1.4(6月8日)用滅菌過的接種環挑取酸奶在平板上劃線純化培養4天左右1.5(6月12日)挑取平板上菌落製成臨時裝片觀察

2、材料:阿須貝無氮培養基、土壤

方法:2.1(6月12日)配備阿須貝無氮培養基(葡萄糖10.0G,磷酸氫二鉀0.2G,硫酸

鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,瓊脂18G,蒸餾水1000ML,PH7.2)阿須貝無氮培養液(葡萄糖10.0G,磷酸氫二鉀0.2G,硫酸鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,蒸餾水1000ML,PH7.2)

2.2(6月12日)培養基,培養液滅菌

2.3(6月12日)用滅菌後冷卻至50攝示度左右的阿須貝無氮培養基到成平板2.4(6月12日)用滅菌過的鑷子將黃豆大小的菜園土埋入已冷凝的平板培養基上2.5(6月12日)正面放置28度培養4天

2.6(6月18日)用滅菌過的接種環挑取菌苔在新的阿須貝平板上劃線純化32度

培養

2.7(6月20日)單菌落接入液體培養基中於H後測吸光值.製備生長

曲線

四、結果分析

1.平板上有一個個單菌落.在顯微鏡下觀察單菌落就只有一種乳酸菌.酸奶中有保加利亞乳菌與嗜熱鏈球菌二種

五、實習感受

通過此次實習,我學到了很多課堂上學不到的東西:親自動手配培養基,分離、純化菌類,

學會使用分光光度計製作生長曲線,同時參觀了一些與微生物緊密相連的公司,瞭解其運行模式、實踐技術和應用。這讓我清楚地感到了自己肩上的重任,看清了自己的人生方向,也讓我認識到了科研工作應支持仔細認真的工作態度,要有一種平和的心態和不恥下問的精神,不管遇到什麼事都要去思考,多聽別人的建議,不要太過急燥,要對自己所做的事去負責,不要輕易地去承諾,承諾了就要努力去兑現。實習也培養了我的實際動手能力,增加了實際的操作經驗,對實際的科研工作的`有了一個新的開始,更好地為我們今後的工作積累經驗。

我知道科研工作是一項需要熱情的事業,並且要持之以恆的精神和吃苦耐勞的品質。我覺得重要的是在這段實習期間裏,我第一次真正地接觸了實驗,在實踐中瞭解了一些科研技術,並且在此期間,我參觀了一些公司,也與社會有所接觸。利用這次難得的機會,也打開了視野,增長了見識,為我們以後進一步走向社會打下堅實的基礎。

實習期間,我從末出現無故缺勤。我認真聽取老師的指導,對於別人提出的實驗建議虛心聽取,並能夠仔細觀察、切身體驗、獨立思考、綜合分析,並努力把學到的知道應用到實際實驗操作中去,盡力做到理論和實際相結合的最佳狀態,培養了我的耐心和素質。

為期兩個多星期的實習結束了,我在兩個多星期的實習中學到了很多在課堂上根本就學不到的知識,受益匪淺。回想自己在這期間的實習情況,也有不足之處。對此我思考過,學習經驗自然是一個因素,然而更重要的是心態的轉變沒有做到位,有些實驗步驟還是停留在應付的層面上。現在發現了這個不足之處,應該還算是及時吧,因為我明白了何謂工作何謂實際。在接下來的日子裏,我會朝這個方向努力,在實驗操作方面我會更加謹慎。

本次實習是我第一次親身感受了所學知識與實際的應用,理論與實際的相結合,讓我們大開眼界,也算是對以前所學知識的一個初審吧!這次實習對於我們以後學習、找工作也真是受益匪淺。我會把這此實習作為我人生的起點,在以後的工作學習中不斷要求自己,完善自己,讓自己做的更好。

微生物實習報告6

歲月如梭,光陰似箭,不知不覺在微生物室實習的時間已經結束了,但收穫頗豐。 通過積極協助老師完成細菌學方面檢驗項目的同時,自己的基礎操作能力有了很大程度的提高,操作起來熟練了非常多。而且通過染色在顯微鏡下能辨認的細菌也更多了,像球菌科的葡萄球菌感染、鏈球菌、淋球菌以及桿菌科的'腸桿菌,真菌孢子在顯微鏡下也能一眼辨認;全片查找結核桿菌的陽性率也提高了。

對什麼類型的標本應做什麼平板接種,培養温度等也有了進一步的掌握,比如:痰標本應接種在血平板,巧克力平板,沙保平板而且還要做塗片染色以監測痰標本的合格程度。血平板和巧克力平板主要觀察病人痰標本里的基礎菌羣的生長狀態,沙保主要觀察是否有念珠菌生長。

總之在微生物一個月的實習日子裏感覺自己受教頗多,通過親身實踐操作把自己在學校學到的理論知識同實踐很好的結合了起來,在帶教老師的悉心指導下已熟悉掌握了各類標本的接種、細菌培養以及細菌的初步鑑定、細菌的藥敏試驗等。

微生物實習報告7

一.實習目的

為了使學生能夠理論聯繫實際,通過親自實地解剖感染小鼠,對小鼠的心、肝、脾進行麥康凱瓊脂平板劃線培養,以柯赫法則為這次實習的主線,達到鑑定出小鼠感染的菌種的目的,熟練運用微生物實驗課的所涉及的實驗操作和方法,提高實驗動手能力,分析實驗過程中可能出現的問題,並解決問題。特開設微生物教學實習,掌握基本技能,加深理論部分的理解,能夠獨立診斷出傳染病病菌,獲得嚴謹的科學實驗素養。

二.實習材料

實驗動物:一隻被感染小鼠,一隻健康小鼠

實驗器械,主要包括:小鼠解剖工具手術剪、鑷子、蠟盤、釘子,接種棒、酒精燈、打火機、記號筆、手套、載玻片、槍頭、注射器、離心管。

實驗材料:麥康凱瓊脂平板、各種染色液(結晶紫溶液、碘溶液、酒精、沙黃水)、蒸餾水、培養基(普通肉湯培養基、蛋白腖培養基、葡萄糖蛋白腖培養基、固體培養基)、PBS重懸液、生化試驗材料(微量發酵管(葡、乳、枸、尿素、麥、甘醇、蔗、硫)、對二甲基氨基苯甲醛、乙醚、甲基紅、vp甲乙液)。

實驗主要儀器:離心機,分光光度器,温箱,搖牀,超淨工作台

三.實習內容

以柯赫法則為主線,通過對感染小鼠的剖解採樣、分離培養、鏡檢、擴增培養,然後把得到的純培養物對健康小鼠進行再次接種以獲得被感染小鼠,再次重複以上操作,把獲得的純培養物通過鏡檢觀察和做生化實驗來鑑定出感染小鼠的致病菌。

四.實習操作進程

第一天:實驗設計、討論症狀、分離剖解

1 實驗設計:以小組為單位進行實驗設計,明確此次實驗主要法則是:柯赫法則。在老師的指導下確定此次實習的主要步驟,討論實驗中可能遇到的問題以及注意事項。

2 討論症狀:比較觀察健康小鼠與病鼠,可見到病鼠一般呈萎靡狀,不活躍。每組領取一隻感染小鼠觀察症狀,體表基本正常。

3 分離剖解:先將麥康凱瓊脂平板分三區,依次寫上肝、脾、心。右手抓起小鼠尾巴,將小鼠搖暈,採用頸椎脱臼法將小鼠處死。將小鼠屍體仰卧固定於蠟盤上,充分露出胸腹部。先用小鼠腹部柔軟部用剪刀剪一小口,然後從該小口處往上、往下剪將皮毛剝離,剝離腹膜暴露出肝臟和脾,可觀察到有輕微的肝腫脹,顏色變淡。將肝和脾切開一小口,用接種環取樣,在麥康凱瓊脂平板的相應區域進行劃線分離。再打開胸腔觀察,可見胸腔有出血現象和凝血塊,剪開心包膜,將心臟切一小口,用接種環取樣,在麥康凱瓊脂平板的相應區域進行劃線分離。寫上班級組別,日期,置於温箱中培養至第二天早上8點。

第二天:挑取單菌落,鏡檢,擴增培養,重懸,測OD配濃度,小鼠腹腔注射

1 挑取單菌落:觀察麥康凱瓊脂平板上菌落的形態為圓形,邊緣整齊,表面光滑,暗紅色,圓心處顏色較邊緣淺。挑去單個菌落,畫上記號準備做後續試驗。

2 鏡檢:選取所挑選菌落的一半進行抹片。取乾淨玻片,滴半滴去離子水,用接種環挑取菌進行抹片、乾燥固定、採用格蘭染色法染色:草酸銨結晶紫染色1-2’,水洗,革蘭氏碘液媒染1-2’,水洗,95%酒精脱色約30’’-1’,水洗,沙黃水溶液復染10 ’ ’-30 ’ ’,水洗。吸乾,鏡檢。觀察到該菌被染成紅色,是格蘭陰性菌。

3 擴增培養:選取剩餘的菌接種到肉湯培養基中,置於温箱培養9個小時至菌的生長對數期。

4 重懸測OD值配濃度:下午5點左右,將培養的菌轉入無菌小管中離心,離心後可見菌沉於管底,在超淨工作台內操作,去上清液,用槍頭吸取PBS液至去了上清液的菌管中,反覆吹打使其重懸,然後再次離心,去上清,重懸,通過分光光度計測得OD590的值,配成2x10^7CFU濃度的菌液。

5 小鼠腹腔注射:每組挑選一隻健康小鼠,在頭部或尾部做上記號,用右手抓住鼠尾,將其搖暈,令其前爪抓住鐵絲蓋上,然後用左手的拇指和食指捏住小鼠頭頸部皮膚,並翻轉左後使其腹部朝上,將其尾巴夾在左手掌與小指之間,右手把持注射器吸取2mL菌液,在股後側面插入針頭,先刺入皮下,後進入腹腔,注射時阻力,皮膚也無泡隆起。注射完將小鼠放回鼠籠即可。

第三天:觀察小鼠發病情況

小組成員分時間段觀察小鼠感染情況,見小鼠瀕死的儘快解剖接種分離致病菌。若 一整天未見小鼠有異常情況的等第二天解剖

第四天:剖解劃線培養

雖然小鼠未見萎靡,由於預訂的感染時間差不多,可以進行解剖接種第一天的操作,

可見體表有淤血點,剖開的小鼠肝臟流出大量的血液。其餘均同第一天的操作,將麥康凱瓊脂平板的上所接的菌置於温箱中培養。

第五天:生化鑑定

觀察到平板上只有一個較小的暗紅色菌落,挑取該菌落進行擴增培養9小時至細菌生長的對數期。下午6點觀察,培養液依舊是澄清的,很可能沒有長菌。為做進一步的驗證,進行生化試驗。將該菌接入微量發酵管和蛋白腖以及葡萄糖蛋白腖中,培養至第二天看結果。

第六天:觀察結果,整理報告

生化試驗無任何反應,説明接的菌為雜菌或污物,整理實驗報告並分析失敗原因。

六.實驗結果與分析

此次試驗失敗

給小鼠攻毒,未能分離出致病菌,因此也無法鑑定出小鼠被感染的病原菌為何種腸桿菌科

試驗失敗原因可能有:

1、接種棒火焰消毒後,等待冷卻的時間過短,接種棒接種菌時將菌燙死

2、由於小鼠的`免疫力強,使得感染小鼠的病原菌被免疫掉了,因此未接種到治病菌

3.給小鼠注射的量或濃度還不夠未能達到使小鼠感染的目的

4、在第一次從小鼠體內分離出來的菌可能不是致病菌,或者麥康凱瓊脂平板上培養出來的 菌落不止一種,而我們挑選到的某一菌落恰好不是致病菌。

5、在進行腹腔注射時,可能沒有注射到腹腔,而只注射到皮下,或者其它部位。

6、採樣時可能由於接種環未完全伸入到心、肝、脾的組織中,或者伸到的組織裏 恰好沒有致病菌

7、可能由於小鼠感染的時間過短,還未達到菌生長曲線的高峯期

七.思考與總結

1 此次試驗失敗的原因有很多在我看來最有可能的原因有以下幾點:

(1) 小鼠免疫:由於這些小鼠是實驗室的小鼠,長期被用來做各種致病菌的實驗,使得它們獲得一定的免疫,所以雖然注射了足夠使小鼠感染髮病的劑量,但也被小鼠免疫掉了,而無法從小鼠體內獲得病料。

(2) 病料不夠:從學姐那瞭解到,她們做攻毒實驗的動物,都是將整個組織塊磨碎以後,再接到培養基上,而我們做實驗是隻是用接種棒挑取一點,接種棒上粘到的病料比較少或根本沒有,因此培養不出菌。

(3) 挑取的單菌落未必是致病菌:由於平板上長出可能不止一種菌,因此挑到的單菌落,未必是致病菌。

2為什麼擴增出來的菌不直接注射小鼠,而要經過離心?

因為菌可能會產生毒素,若直接注射可能就無法判斷使小鼠發病的到底是毒素作用,還是因為病菌在小鼠體內繁殖感染而造成的。

3 腸桿菌科有哪些,特徵有哪些?

學生自我鑑定:

xx年5月16號到21號期間進行了維持一週的微生物實習,在微生物實習期間,我能夠做到主動和小組成員交流、合作、解決問題,認真完成實驗操作,學會靈活運用自己的專業知識解決問題。

通過這段時期的實習,我們對無菌操作有了進一步的理解,掌握了儀器操作的基本技能,鞏固了理論部分的知識,也瞭解到公共衞生意識的重要性。

實習不過短短的五天,在這短暫的五天內,我們有過發現時的喜悦,有過解剖小鼠時的緊張,有過培養不出菌時的困惑,但最終我們收穫了知識,也收穫了友誼,在合作中共同進步,在困難中共同進退,一切的困難便能迎刃而解。

這次微生物實習為我們專業的繼續拓展提供了寶貴的經驗,為動物醫學本科專業的我們學習後續課程奠定紮實的基礎。

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