臨牀微生物標本採集與轉運系統的現狀與展望
標本的採集及轉運是臨牀微生物實驗室分析前檢驗的一個重要的組成部分，正確的採集及轉運系統直接關係到致病菌培養的陽性率及正確率的高低，是臨牀微生物檢驗成功的關鍵。下面是yjbys小編為大家帶來的臨牀微生物標本採集與轉運系統的現狀與展望的知識，歡迎閲讀。
一、我國臨牀微生物分析前檢驗現狀
目前，我國臨牀微生物檢驗分析前檢驗領域還存在不少問題，如很多醫院都存在標本採集方式不正確、運送時間過長和儲存温度不適宜等情況。近年來，隨着臨牀微生物學者們的呼籲和相關學術討論的深入，臨牀微生物分析前檢驗的重要性已經逐漸被醫學同行們所認可。目前我國臨牀微生物學分析前檢驗的關注點主要集中於檢驗標本是否合格、有無進行不合格標本的退檢及與臨牀的溝通等，而影響臨牀微生物檢驗結果的一個重要因素———標本轉送容器的質量卻很少受到關注。
與臨牀生物化學、臨牀免疫學和臨牀血液學檢驗相比，臨牀微生物檢驗標本類型複雜，故轉運容器的製作與標準化也要複雜得多。臨牀生物化學、臨牀免疫學和臨牀血液學檢驗以血標本為主，相關的標準化採血管的製作也已成熟並應用於臨牀，對提高檢驗結果質量以及結果的標準化具有重要意義。臨牀微生物檢驗標本類型具有多樣性，有固體(如組織)、半固體(如糞便)和不同黏度的流體(如痰、膿、抽吸物、血液和尿液等)。因此，相應的存放樣本的容器形狀和大小也具有多樣性。基本上，在我國臨牀微生物檢驗實際應用的標本轉運容器中，除了血培養瓶得到標準化和規範之外，其他類型的標本採集和轉送系統或多或少都存在一些問題，如轉運容器密封性不夠、未達到無菌要求和容易出現泄露等，極大地影響了臨牀微生物檢驗的質量。
由於不同標本黏稠度差異較大，臨牀操作與相應的處理就比較困難。近年來這一難題已有所突破，通過液基微生物學將各種類型的微生物標本轉化為溶液，可以實現臨牀各種標本的標準化，相關產品也不斷問世。而國內對臨牀微生物標本採集拭子和運輸系統的質量以及採集效率的關注很少，目前所採用的標本採集及運輸的工具較簡單，多為傳統的纖維拭子、普通的塑料無菌容器等，不能保證病原菌在運送過程中的活力，嚴重影響了臨牀微生物檢驗的質量。特別是現在越來越多的醫院開始使用自動化的氣動物流標本傳輸系統，轉運容器密封性差，經常出現標本泄露，嚴重影響檢驗質量，檢驗人員也日益意識到標本轉運系統質量的重要性。同時，臨牀微生物檢驗一個重要的發展方向是自動化，而目前五花八門的轉運容器無法適應這一發展趨勢。因此，現代檢驗的氣動物流標本運輸系統及臨牀微生物檢驗全自動化發展方向均呼籲臨牀微生物檢驗領域採用高質量的標本採集與轉運系統。
二、新型標本採集及轉運系統
1. 尿液標本採集與轉運系統：目前應用較多新型的尿液轉運系統主要為Uriswab尿液收集系統以及Vacutainer Plus Urine C&S Preservative Tubes。Uriswab尿液收集系統是主要由海綿拭子組成，海綿中含有硼酸和甲酸鈉的聚合物，接觸到尿液會進行活化，可減少運輸過程中出現菌羣過度生長或過度死亡的現象。此係統操作簡單，安全且無泄漏，在冷藏或室內温度下保持細菌生存力可達48 h。另一種新型的尿液採集轉運系統為Vacutainer Plus Urine C&S Preservative Tubes，它自帶凍乾粉保存劑(硼酸緩衝液、甲酸鈉和硼酸鈉)，可使尿液在非冷藏條件下儲存48 h。
2. 痰標本採集與轉運系統：痰標本採集與轉運系統製作最大的難點為痰標本具有明顯的非均質性，細菌等成分的分佈濃度很不均勻，故痰液稀釋在微生物分離培養中有重要意義。傳統的胰酶預處理痰液的方法，耗時較長，應用液在常温下不易保存，且反覆凍融容易失效，往往需現配現用。a-糜蛋白酶溶液消化所需時間更短，但成本較高。新型的痰標本採集與轉運系統採用的是SL solution來進行痰標本液化，其有效成分是二硫蘇糖醇(dithiothreitol, DTT)，其溶解痰液的溶劑裝在無菌塑料管裏，無須再進行水化，且其在室温下穩定，保質期長，可以隨取隨用，方便檢驗人員的臨牀操作。
3. 糞便標本採集與轉運系統：FecalSwab是一種採集、運輸、儲存便樣的轉運系統，其配方是為保持腸桿菌科細菌的生存力而特別設計。其專門設計的植絨拭子，可以精準地採集標本。用途較廣，樣本可以直接在血培養皿上進行畫線或者分離，也可以分為等份試樣後轉移至選擇性增菌培養液中再進行操作，可用於PCR。有研究表明，FecalSwab在保持糞便中病原體活力方面較Eswab及其他常用的轉運系統(如干燥容器及Amies凝膠拭子)有明顯優勢。
4. 細胞及核酸標本採集與轉運系統：Cymol是一種用於細胞及核酸的運輸和儲存的轉運系統。三種酒精混合液有利於標本的保存，並可抑制普通菌羣過度生長。基質可保持核酸的穩定性，可通過基於RNA與DNA的分子核酸檢測，檢測人乳頭瘤病毒、衣原體和淋病奈瑟菌。Enat是一種為分子生物應用而設計的運送核酸的系統，配方中加入了去污劑，保證樣本達到穩定狀態。還可對傳染性病原體進行滅活，降低檢驗人員接觸未知病毒的風險。
5. 病毒標本採集與轉運系統：新型通用病毒採集運輸系統可用於病毒、支原體、衣原體及脲原體的採集運輸。可在室温或冰上(2-25 ℃)儲存病原體至少48 h。含有低温防護劑用於病毒及支原體在冰上的保存，基質內含抑制細菌及真菌生長的抗菌藥物以防止污染。
6. 其他轉運系統：2005年研發的Eswab拭子，是目前微生物技術較先進的運輸系統，它能在室温和冰箱温度下保持需氧菌、厭氧菌和苛養菌生存力長達48 h，是一種多用途液基採集儲存系統。Eswab由一個植絨拭子和一個1 ml的Amies液體管組成使樣本採集過程的損傷變得更低，並且能收集更多的樣本，立即洗脱進液相中以進一步多重分析。有學者報道：Eswab中病原菌的復甦率是其他轉運系統(MaxV和Remel BactiSwab)的十倍以上。
三、不同標本採集與轉運系統比較研究
目前，關於不同標本採集與轉運系統的比較研究，只有來自國外學者的研究資料。不同的病原菌、轉運温度及轉運時間對於轉運系統的要求也有所不同。用無炭的Amies瓊脂凝膠轉運金黃色葡萄球菌，細菌活力最長可達18 d;Gladstone等對105篇文章做出的Meta分析顯示：對於肺炎鏈球菌的轉運，尼龍植絨拭子在標本的吸收和釋放方面有較好作用;而在轉運介質方面，WHO推薦的牛奶、胰蛋白腖、葡萄糖、甘油組成的介質(STGG)比只有牛奶，葡萄糖及甘油組成的介質(SGG)有較高的復甦率。在對於厭氧菌的轉運過程中，採用Eswab轉運的標本，其細菌的復活率都明顯高於MaxV系統和RBS系統。Hirvonen和Kaukoranta對12株ATCC標準菌株及328株臨牀糞便標本的研究發現：Eswab和FecalSwab優於傳統的標本轉送系統(Amies gel swabs和dry containers)，Eswab更適合糞便標本的採集與轉送，但FecalSwab在不同温度的標本保存方面具有較明顯的優勢。
在不同的環境下宜選擇不同的轉運系統。有研究發現同是針對厭氧菌的Port-A-Cul轉運系統
與COMP傳統轉運系統，在4℃時，兩者在保持細菌活力方面都具有較好的作用;而在室温下，Port-A-Cul轉運系統就比COMP傳統的轉運系統有明顯優勢。當樣品不能得到及時的.處理或冷藏時，ETA比Amies和Stuarts培養基有較明顯優勢。
四、標本採集與轉運系統在多重耐藥菌株分離中的應用
新型的轉運系統對於多重耐藥(Multidrug resistance, MDR)菌株的分離有重要的意義。有研究表明，Eswab在轉移多重耐藥鮑曼不動桿菌時，其在0、1、24和48 h的復活率均明顯高於普通的標準轉運系統(standard swab system, SSS)2倍以上。即使是在轉運時間延長或者接種液較少的情況下，Eswab轉運的標本，其病原體仍然能保持較高的復活率。在冰凍的情況下，接種可至少延遲2周。Lerner等學者成功將Eswab轉運系統用於碳青黴烯耐藥腸桿菌科細菌(carbapenem-ressistant Enterobacteriaceae, CRE)的分離培養，取得了較好的效果。Smismans等將Eswab轉運系統應用於MRSA菌株的分離，並取得了Venturi swab轉運系統3.6倍的標本採集與復甦效率。可見，新型標本採集與運送系統在多重耐藥的分離中也發揮着重要作用。
五、標本採集與轉運系統的未來發展展望
近年來，微生物檢驗的標準化和自動化已成為各個實驗室的發展方向。自動化的檢驗能夠提高檢驗質量，提高檢驗效率，減少人為誤差，並能夠節省人力，提高生物安全性等。採用方便、快捷、高性能的標本轉運系統在自動化的進程有重要意義。標本採集與運送系統領域未來的發展與研究將集中於：(1)進一步立足臨牀需求，開發與完善臨牀微生物標本採集與轉運系統，提升臨牀微生物檢驗質量;(2)進一步評估不同標本採集與轉運系統在不同目標病原菌、不同標本運送温度和不同儲存温度下的差異，以根據實際情況合理選擇適合所在實驗室的轉運系統;(3)研究不同標本採集與轉運系統在感染控制中的應用，特別是多重耐藥菌的分離。
我國臨牀微生物學家對微生物標本採集與轉運系統加強了重視，各個醫院也都意識到標本採集與轉運系統的重要性，制定了微生物標本採集手冊與轉運系統相關的操作指南。目前，制約標本轉運系統的發展的一個重要因素為臨牀微生物檢驗的收費問題。國內的微生物檢驗成本較高，收費較低，缺乏資金使得微生物實驗室在改進標本採集和轉運系統的過程中舉步維艱。筆者建議在目前的收費系統中增加單收材料費，這有利於臨牀微生物檢驗質量的提升。希望本文的介紹可以推動各種新型轉運系統在我國臨牀微生物檢驗領域的應用，進一步提升臨牀微生物檢驗的質量，促進微生物檢驗標準化及自動化的發展。同時，也希望中國臨牀微生物學者積極關注新型標本採集與轉運系統，進行臨牀研究、評估與應用，並總結相關經驗與資料，向國際同行展示來自中國的循證臨牀微生物學資料，提升中國臨牀微生物界在國際上的影響力!
