高二生物選修一知識點總結

知識點是構成企業員工崗位所需技能的相對獨立的最小單元，下面yjbys小編為大家準備了高二生物的知識點，歡迎閲讀。

培養基：人們按照微生物對營養物質的不同需求，配製出供其生長繁殖的營養基質，是進行微生物培養的物質基礎。

培養基按照物理性質可分為液體培養基 半固體培養基和固體培養基。在液體培養基中加入凝固劑瓊脂(是從紅藻中提取的一種多糖，在配製培養基中用作凝固劑)後，製成瓊脂固體培養基。微生物在固體培養基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。根據菌落的特徵可以判斷是哪一種菌。液體培養基應用於工業或生活生產，固體培養基應用於微生物的分離和鑑定，半固體培養基則常用於觀察微生物的運動及菌種保藏等。

按照成分培養基可分為人工合成培養基和天然培養基。合成培養基是用成分已知的化學物質配製而成，其中成分的種類比例明確，常用於微生物的分離鑑定。天然培養基是用化學成分不明的天然物質配製而成，常用於實際工業生產。

按照培養基的用途，可將培養基分為選擇培養基和鑑定培養基。選擇培養基是指在培養基中加入某種化學物質，以抑制不需要的微生物生長，促進所需要的微生物的生長。鑑別培養基是根據微生物的特點，在培養基中加入某種指示劑或化學藥品配製而成的，用以鑑別不同類別的微生物。

培養基的化學成分包括 水 、 無機鹽 、 碳源 、 氮源 (生長因子)等。

碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質。如CO2、NaHCO3等無機碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機碳源。異養微生物只能利用有機碳源。單質碳不能作為碳源。

氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質。如N2、NH3、NO3-、NH4+(無機氮源)蛋白質、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白腖(有機氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。

培養基還要滿足微生物生長對PH、特殊營養物質以及氧氣的要求。例如，培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素，培養黴菌時須將培養基的pH調至酸性，培養細菌是需要將pH調至中性或微鹼性，培養厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件

無菌技術獲得純淨培養物的關鍵是防止外來雜菌的入侵，要注意以下幾個方面：

①對實驗操作的空間、操作者的衣着和手，進行清潔和消毒。

②將用於微生物培養的器皿、接種用具和培養基等器具進行滅菌。

③為避免周圍環境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。

④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

無菌技術除了用來防止實驗室的培養物被其他外來微生物污染外，還有什麼目的?

答：無菌技術還能有效避免操作者自身被微生物感染。

消毒與滅菌的區別

消毒指使用較為温和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法(對於一些不耐高温的液體)還有化學藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。

滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、乾熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。

滅菌方法：

①接種環、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;

②玻璃器皿、金屬用具等使用乾熱滅菌法，所用器械是乾熱滅菌箱 ;

③培養基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋 。

④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈 。

製作牛肉膏蛋白腖固體培養基

(1)方法步驟：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。

(2)倒平板操作的步驟：

①將滅過菌的培養皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養基的錐形瓶，左手拔出棉塞。

②右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。

③用左手的拇指和食指將培養皿打開一條稍大於瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養基(約10～20mL)倒入培養皿，左手立即蓋上培養皿的皿蓋。

④等待平板冷卻凝固，大約需5～10min。然後，將平板倒過來放置，使培養皿蓋在下、皿底在上。

倒平板操作的討論

1.培養基滅菌後，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什麼辦法來估計培養基的温度?

提示：可以用手觸摸盛有培養基的錐形瓶，感覺錐形瓶的温度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。

2.為什麼需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養基。

3.平板冷凝後，為什麼要將平板倒置?

答：平板冷凝後，皿蓋上會凝結水珠，將平板倒置，既可以防止培養基表面的水分過度地揮發，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染。

4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養微生物嗎?為什麼?

答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養基上滋生，因此最好不要用這個平板培養微生物。

純化大腸桿菌

(1)微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋塗布平板法。

(2)平板劃線法是通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。在數次劃線後培養，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞羣體，這就是菌落。

(3)稀釋塗布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。分為系列稀釋操作和塗布平板操作兩步。

(4)用平板劃線法和稀釋塗布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落，以便於純化菌種。

(5)平板劃線法操作步驟：

①將接種環放在火焰上灼燒，直到接種環燒紅。②在火焰旁冷卻接種環，並打開棉塞。

③將試管口通過火焰。④將已冷卻的接種環伸入菌液中蘸取一環菌液。

⑤將試管通過火焰，並塞上棉塞。⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養皿。⑦灼燒接種環，待其冷卻後，從第一區域劃線的末端開始往第二區域內劃線。重複以上操作，在三、四、五區域內劃線。注意不要將最後一區的劃線與第一區相連。⑧將平板倒置放入培養箱中培養。

平板劃線操作的討論

1.為什麼在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環?在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環嗎?為什麼?

答：操作的第一步灼燒接種環是為了避免接種環上可能存在的微生物污染培養物;每次劃線前灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束後，接種環上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環上的菌種直接來源於上次劃線的末端，從而通過劃線次數的增加，使每次劃線時菌種的數目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結束後灼燒接種環，能及時殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染環境和感染操作者。

2.在灼燒接種環之後，為什麼要等其冷卻後再進行劃線?

答：以免接種環温度太高，殺死菌種。

3.在作第二次以及其後的劃線操作時，為什麼總是從上一次劃線的末端開始劃線?

答：劃線後，線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨着劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。

(6)塗布平板操作的步驟：

①將塗布器浸在盛有酒精的燒杯中。②取少量菌液，滴加到培養基表面。

③將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃，待酒精燃盡後，冷卻8～10s。

④用塗布器將菌液均勻地塗布在培養基表面。

塗布平板操作的討論

塗布平板的所有操作都應在火焰附近進行。結合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應如何進行無菌操作?

提示：應從操作的各個細節保證“無菌”。例如，酒精燈與培養皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。

菌種的保存

(1)對於頻繁使用的菌種，可以採用臨時保藏的方法。

①臨時保藏方法

將菌種接種到試管的固體斜面培養基上，在合適的温度下培養。當菌落長成後，將試管放入4℃的冰箱中保藏。以後每3～6個月，都要重新將菌種從舊的培養基上轉移到新鮮的培養基上。

②缺點：這種方法保存的時間不長，菌種容易被污染或產生變異。

(2)對於需要長期保存的菌種，可以採用甘油管藏的方法。

在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油後滅菌。將1mL培養的菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻後，放在-20℃的冷凍箱中保存。

疑難解答

(1)生物的營養

營養是指生物攝取、利用營養物質的過程。營養物質是指維持機體生命活動，保證發育、生殖所需的外源物質。

人及動物的營養物質：水、無機鹽、糖類、脂質、蛋白質、維生素六類。

植物的營養物質：礦質元素、水、二氧化碳等三類。

微生物的營養物質：水、無機鹽、碳源、氮源及特殊營養物質五類。

(2)確定培養基製作是否合格的方法

將未接種的培養基在恆温箱中保温1～2天，無菌落生長，説明培養基的製備是成功的，否則需要重新制備。